1.血清问题:宁愿用进口的新生牛血清,也不要用国产的胎牛血清.不知你用的什么血清2.细胞冻存的方法不当或者冻存时细胞的状态不好.长期保存应该放在液氮里,-80度不应该超过6月.不知你的细胞从哪儿来的,如果是这个原因,那就没有特别好的方法来解救,你可以试着加大血清比例,如15%,20%等,用进口的胎牛血清,看能否救活.3. 细胞污染.特别是支原体污染 可以按照atcc上要求的培基培养试试(转)
细胞名称A20ATCC 号TIB-208?培养基RPMI-1640 90%, 0.05 mM 2-mercaptoethanol, fetal bovine serum10%培养方法培养条件:37℃细胞密度:1 x 105 and 1 x 106 cells/ml培养基更新:2-3天更新一次生长特性淋巴细胞,悬浮生长来源BALB/cAnN 小鼠网状细胞肉瘤遗传特性diploid; modal number = 37; range = 33 to 38参考文献Kim KJ, et al. Establishment and characterization of BALB/c lymphoma lines with B cell properties. J. Immunol. 122: 549-554, 1979.Glimcher LH, et al. Ia antigen-bearing B cell tumor lines can present protein antigen and alloantigen in a major histocompatibility complex-restricted fashion to antigen-reactive T cells. J. Exp. Med. 155: 445-459, 1982.
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