显色试剂大体上有两个分类,第一类是通用的显色剂,主要用来检查一般常见的有机化合物 。第二类是按照化合物的详细类别或者比较特殊的功能,量身定做的专属性显色剂 。经过全面的分析和统计,显色试剂类别多种多样,数量繁多,现只就通用显色剂的具体类目来简单介绍下 。
一般的通用显色剂:
第一个就是硫酸的溶液了 , 硫酸与水、甲醇或者乙醇按照一比一的浓度进行调配 。还有就是1.5摩尔每升的硫酸溶液与0.5到1.5摩尔每升硫酸铵溶液,喷后110摄氏度烘烤十五分钟,此时不同的有机化合物会显示不同的颜色 。
第二个是含有0. 5%碘的氯仿溶液,对很多化合物显黄棕色 。
第三个是PH值呈中性且含有0.05%高锰酸钾的溶液,针对还原性较为容易的化合物,通常会在淡红色背景上面显现出黄色 。
第四个是酸性高锰酸钾试剂,喷含有1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液,在溶解过程时刻需注意防止爆炸,喷后薄层在180摄氏度加热十五到二十分钟 。
第五个是酸性重铬酸钾试剂,喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液 , 必要时在150高温条件下烤薄层 。
第六个是5%磷钼酸乙醇溶液,喷后120摄氏度烘烤,还原性化合物显蓝色, 再用氨气薰,则背景变为无色 。
第七个是铁氰化钾-三氯化铁试剂,还原性物质显蓝色 , 再喷2摩尔每升盐酸溶液,则蓝色加深 。
显色剂的选择原则有以下四点:
(1)显色剂的灵敏度要高 。
(2)显色剂的选择性要好 。
(3)所形成的有色化合物的稳定度要大,颜色要稳 , 而且有确定的组成比 。
(4)其他 , 如显色剂的溶解度、稳定性及性格等 。
显色剂分类:
显色剂有两类:通用显色剂和特效显色剂 。根据被检物的化学组成是否遭受破坏,显色剂分为破坏性显色剂和非破坏性显色剂 。
在实验中我们一般将它调配成A,B两种液体,当需要显色时就分别加入A , B液,当混合液与实验中复合物(抗原抗体复合物)反应就会产生显色效果 。
A液一般由:PBS缓冲液,柠檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸 , ProcLin-300 , 过氧化氢(过氧化氢挥发性太高,容易丢失 , 我们现在正用过氧化脲来代替 , 效果还不错)组成 。
B液一般由:PBS缓冲液,柠檬酸,ED-TA乙二氨四乙酸,ProcLin-300,硫代硫酸钠等 。
【常用的显色剂有哪些?】由于显色液的反应一旦开始就一直持续反应,所以,当达到理想效果时一定要终止反映,就需要加入终止液了 。
三氯醋酸试剂 。显色剂是一种将生化反应后产生的复合物显色以达到实验目的的一种试剂,皂苷纸色谱显色剂是三氯醋酸试剂,皂苷是一类较复杂的苷类化合物 , 与水混合振摇时 , 可生成持久性的似肥皂泡沫状物 。
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