液相色谱仪操作及原理 怎么看懂液相色谱图


液相色谱仪操作及原理 怎么看懂液相色谱图


一、原理
在色谱法中存在两相 , 一相是固定不动的 , 我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相 , 我们把它叫做流动相 。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的 。
使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面 。当流动相中携带的混合物流经固定相时 , 混合物中的各组分与固定相发生相互作用 。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异 , 与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同 , 随着流动相的移动 , 混合物在两相间经过反复多次的分配平衡 , 使得各组分被固定相保留的时间不同 , 从而按一定次序由固定相中先后流出 。与适当的柱后检测方法结合 , 实现混合物中各组分的分离与检测 。
二、应用
1、在食品研究中的分析应用
(1)食品中的天然成分
碳水化合物
类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸
(2)食品添加剂
酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂
颜料和染料(色素〕
维生素
(3)污染物
霉菌(黄曲霉毒素)
农药和兽药残留
多环芳烃(PAHS)和亚硝酸
2、在医药研究中分析应用
药物分析有USP、BP、CP等标准
常用药物研究中的应用:解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等 。
甾体药物研究中的应用:肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等 。
抗菌素类药物研究中的应用:青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等 。
中草药研究中的应用:生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类
手性药物研究中的应用:光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小 , L-异构体毒性很强)
医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究 。
3、在生物化学和生物工程中的应用
(1)氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究
核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究(儿茶酚胺类)
(2)在精细化工分析中的应用
醇、醛和酮、醚的分离分析
酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究
药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用
饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析
4、在公安、刑警破案工作需要毒品分析等
(1)在环境污染分析中的应用
(2)废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留酚类和胺类的检测
三、液相色谱图相关术语
色谱峰-Peak
色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号的微分曲线
峰底-Peak Base
峰的起点与终点之间连接的直线
峰高 – Peak Height
峰最大值到峰底的距离
峰宽-Peak Width
在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离
半(高)峰宽-Peak Width at Half Height
通过峰高的中点作平行于峰底的直线 , 其与峰两侧相交两点之间的距离
峰面积-Peak Area
峰与峰底之间的面积,又称响应值
标准偏差;σ-Standard Error
0.607倍峰高处所对应峰宽的一半
拖尾峰 – Tailing Peak
后沿较前沿平缓的不对称峰
前伸峰- Leading Peak
前沿较后沿平缓的不对称峰
鬼峰- Ghost Peak
并非由试样所产生的峰;亦称假峰
基线-Baseline

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