![crisprcas9的原理 crisprcas9的原理是基因突变还是基因重组](http://pic.yunnanlong.com/231113/1T9315E6-0.jpg)
此系统的工作原理是crRNA(CRISPR-derivedRNA)通过碱基配对与tracrRNA(trans-activatingRNA)结合形成tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA 。而通过人工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA(singleguideRNA) , 足以引导Cas9对DNA的定点切割 。
【crisprcas9的原理 crisprcas9的原理是基因突变还是基因重组】作为一种RNA导向的dsDNA结合蛋白,Cas9效应物核酸酶是已知的第一个统一因子(unifyingfactor),能够共定位RNA、DNA和蛋白,从而拥有巨大的改造潜力 。将蛋白与无核酸酶的Cas9(Cas9nuclease-null)融合,并表达适当的sgRNA , 可靶定任何dsDNA序列,而sgRNA的末端可连接到目标DNA , 不影响Cas9的结合 。因此,Cas9能在任何dsDNA序列处带来任何融合蛋白及RNA , 这为生物体的研究和改造带来巨大潜力 。
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