不利用碘液,为什么用斐林试剂鉴定蔗糖淀粉和淀粉酶

不利用碘液,怎样证明淀粉水解的存在

不利用碘液,为什么用斐林试剂鉴定蔗糖淀粉和淀粉酶


如果不用碘液鉴定淀粉的存在,可以使用斐林试剂来鉴定是否生成了还原性糖,麦芽糖和葡萄糖都是还原性糖,淀粉则是非还原性糖 。斐林试剂用法如下:
斐林试剂是由质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液(A液)和质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液(B液),按照1:1体积比混合配制而成,由于新配制的斐林试剂不稳定,所以使用时,现配现用 。取2ml新配的斐林试剂加入到盛有还原性糖溶液的试管中,混合均匀后,将试管在沸水浴条件下加热1-2min,就会出现砖红色沉淀 。
如果试管中淀粉没有水解,因为淀粉为非还原性糖,将斐林试剂加入后,水浴加热不会出现砖红色,如果试管中淀粉水解了,无论是初步水解还是彻底水解,都会产生还原性糖(麦芽糖和葡萄糖都是还原性糖),还原性糖可以与斐林试剂反应,水浴加热后,出现砖红色沉淀 。
为什么用斐林试剂鉴定蔗糖淀粉和淀粉酶根据条件,这应该是一个有关淀粉酶特异性的实验,其目的是证明淀粉是淀粉酶的底物,蔗糖不是淀粉酶的底物 。淀粉和蔗糖与斐林试剂都不发生反应 。但是,在酶作用最适条件下,如果淀粉经酶促反应水解就会产生还原性产物能与斐林试剂反应 。如果蔗糖经过与淀粉一样的实验条件,其反应液能够与斐林试剂反应,说明淀粉酶能催化蔗糖水解,如不能够与斐林试剂反应,说明淀粉酶不能催化蔗糖水解 。
理论上,蔗糖不是淀粉酶的作用底物,不能与斐林试剂反应 。实验可以证明之 。这一酶反应特异性的鉴别反应为什么不用碘液?因为碘液与淀粉显蓝色反应 。但是,淀粉完全水解后得到麦芽糖(或少许葡萄糖)遇碘液不显蓝色而是碘色 。蔗糖遇碘液也是显碘色 。所以,碘液不能区分水解产物,不能说明哪种物质是淀粉酶作用的底物 。
另外,如果实验酶活性不能催化淀粉完全水解,只要残存微量淀粉也会显蓝色,影响结果观察 。碘液可以用来指示淀粉酶活性的大小 。底物淀粉在酶作用最适条件下,其水解程度取决于淀粉酶活性大小,可得到一些不完全的中间产物如蓝色糊精、紫色糊精等,直到最终得到麦芽糖(或少许葡萄糖) 。这一系列水解产物分别与碘液显示颜色:蓝色—浅蓝—紫色—碘色 。由此反映酶活性大小的差异 。
探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性作用时为什么不可用碘液替代斐林试剂进行鉴定
应该是利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和斐林试剂验证酶的专一性,不能用碘液 。
如果用碘液的话,开始蔗糖和淀粉酶不反应,碘不变色,如果真被淀粉酶催化水解了照样不会变蓝 。淀粉和淀粉酶反应,若淀粉完全被分解,加碘液也不变蓝 。那么,这两组实验现象是一样的,无法区分 。
这个实验要用斐林试剂检测,淀粉和淀粉酶反应,有麦芽糖产生,与斐林试剂变砖红色 。而蔗糖和淀粉酶这组不变砖红色 。
不利用碘液你怎样证明淀粉水解的存在呢
这个问题我来回答:淀粉彻底水解产物是葡萄糖.但是淀粉是逐级水解的,淀粉初步水解产物是麦芽糖,麦芽糖继续水解则水解为葡萄糖.如果不用碘液鉴定淀粉的存在,可以使用斐林试剂来鉴定是否生成了还原性糖,麦芽糖和葡萄糖...
怎样检验淀粉是否完全水解了
错了 。加NaOH到碱性,也会部分水解剩下未被硫酸水解的淀粉,万一这一下全水解了,你说算谁的?这是其一,溶液呈碱性,碘是卤素,必然能和碱溶液反应,这还怎么检测?
【不利用碘液,为什么用斐林试剂鉴定蔗糖淀粉和淀粉酶】

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