蛋白质的发现分类 蛋白质的提纯和分离四步( 三 )


②糖蛋白的非蛋白质部分是糖,称为糖蛋白 。广泛存在于动物、植物、真菌、细菌和病毒中 。
③脂蛋白蛋白与脂质结合形成脂蛋白 。在脂蛋白中,脂质和蛋白质通过非共价键结合 。广泛分布于细胞和血液中 。
④色蛋白蛋白与一些色素物质结合形成色蛋白 。非蛋白部分多为血红素,故又称血红素蛋白 。
⑤金属蛋白是一类直接与金属结合的蛋白质,如含铁的铁蛋白;乙醇脱氢酶含有锌,黄嘌呤氧化酶含有钼和铁 。
⑥磷蛋白分子中含有磷酸基团,一般通过酯键与蛋白质分子中的丝氨酸或苏氨酸相连 。如酪蛋白和胃蛋白酶,都属于这类蛋白质 。
⒌根据需求 。
食物中的蛋白质必须经过胃肠道的消化,分解成氨基酸,才能被人体吸收利用 。人体对蛋白质的需要,其实就是对氨基酸的需要 。吸收的氨基酸只能在数量和种类上满足人体的需要,身体才能利用它们合成自己的蛋白质 。
(1)必需氨基酸
必需氨基酸是指人体自身不能合成或合成速度不能满足人体需要,必须从食物中摄取的氨基酸 。对成人来说,有8种氨基酸,包括赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸和苯丙氨酸 。对婴儿来说,有9种,多一种组氨酸 。如果体内缺乏必需氨基酸,就无法为身体各组织合成足够的蛋白质,其他多余的蛋白质也会被身体的新陈代谢所浪费,所以保证必需氨基酸的充足摄入非常重要 。
(2)非必需氨基酸
非必需氨基酸不是指人体不需要这些氨基酸,而是指人体可以自行合成或由其他氨基酸转化而来,不需要直接从食物中摄取 。这些氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸(及其胺)、脯氨酸、精氨酸、组氨酸、酪氨酸和胱氨酸 。一些非必需氨基酸,如胱氨酸和酪氨酸,如果供应充足,也可以省去必需氨基酸中蛋氨酸和苯丙氨酸的需要量 。
五、蛋白质的分离纯化 。
许多蛋白质在结构和性质上有许多相似之处,因此蛋白质的分离是一项复杂的任务 。蛋白质纯化的目的是提高产品的纯度和收率,同时保持和提高产品的生物活性 。所以,要想分离纯化某种蛋白质,首先要选择富含蛋白质的材料 。其次,制备活性蛋白应避免蛋白质变性 。对于大多数蛋白质来说,纯化操作是在0 ~ 4℃的低温下进行的 。同时也要避免酸碱过多的条件,以及剧烈的搅拌和振荡 。此外,应尽量去除变性蛋白和其他外源蛋白,以提高纯度和收率 。
1 。原材料的选择
选择适当的富含这种蛋白质的食物或其他材料 。
【蛋白质的发现分类 蛋白质的提纯和分离四步】2 。预处理和细胞破碎
在分离纯化某种蛋白质时,首先要使蛋白质从组织或细胞中释放出来,保持其原有的自然状态,不丧失其活性 。破碎组织细胞的常用方法有:
(1)机械破碎这种方法是利用机械力的剪切作用来破碎细胞 。常用的设备有高速组织捣碎机、均质机、研钵等 。
(2)渗透破碎法这种方法是在低渗条件下,使细胞膨胀破碎 。
(3)反复冻融法生物组织冷冻后,胞内液冻结膨胀,导致细胞破裂 。这种方法简单方便,但需要注意的是不适用于对温度变化敏感的蛋白质 。
(4)超声波法利用超声波振动器,使细胞膜上的张力不均匀,使细胞破裂 。
(5)用溶菌酶破坏微生物细胞等酶法 。
3 。蛋白质的提取
蛋白质通常通过选择合适的缓冲溶剂来提取 。用于提取的缓冲液的pH、离子强度、组成和其他条件的选择应取决于待制备的蛋白质的性质 。白蛋白可以用水提取;球蛋白可用中性盐溶液提取;面筋可以用稀酸或稀碱提取;用适当浓度的乙醇提取醇溶液中的谷蛋白 。例如在膜蛋白的提取中,表面活性剂(十二烷基磺酸钠等 。)通常被添加到提取缓冲液中,以破坏膜结构并促进蛋白质从膜中分离 。在提取过程中,需要保持低温以减少降解酶的作用 。一般在0℃附近提取 。避免剧烈搅拌等 。,防止蛋白质变性 。

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