（1）母种制作
组织分离法简单易行 ， 后代变异小 ， 能保菌株的优良特性 ， 它是生产上常用的菌种分离法 。种菇应选择外观典型 ， 大小适中 ， 菌盖表面鳞片较少 ， 颜色纯白无病虫害的头潮菇 ， 采摘种菇应在鸡腿菇生长的棒状后期或梭形前期 。
母种培养基可选择PDA培养基 ， 也可用如下配方：小麦600克 ， 鲜子实体100克 ， 葡萄糖20克 ， 蛋白胨3克 ， 磷酸二氢钾0.5克 ， 磷酸氢二钾1克 ， 硫酸镁1克 ， 硫酸钙1克 ， 琼脂25克 ， 水1000 毫升 。母种培养基的制作过程及无菌分离技术同其它食用菌制种技术 ， 不再介绍 。
（2）原种制作
鸡腿菇原种制作多采用麦粒种 ， 其配制方法如下：麦粒浸泡24小时左右 ， 至麦粒露白 ， 用清水冲洗后煮沸20-25分钟 ， 捞出沥干水后加1％石膏粉 ， 20％已粉碎的麦秆发酵料 ， 然后装瓶 ， 灭菌、无菌接种与培养 。此配方菌丝生长旺盛 ， 生长速度快 ， 在25℃环境下750毫升菌种瓶12~15天可长满瓶 。
（3）栽培种的制作
鸡腿菇栽培种培养基多用棉壳、麦秆发酵料配制 。配方如下：麦秆牛粪发酵料33%、麸皮10 %、棉籽皮50％、玉米粉5％、石灰2% 。先将麦秆粉碎中加牛粪20％-30% ， 加石膏2％ ， 堆积发酵5-6天 ， 然后加入其它原料 ， 发酵48小时即可装袋灭菌 ， 无菌接种与培养 。此配方比单纯用发酵料及单纯用棉籽皮有发酵快、菌丝壮的优点 。
【鸡腿菇菌种制作方法】
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