1、从液氮中取出一管细胞 。
【重悬怎么操作】2、将冻存管置于37摄氏度水浴中2分钟（或放到管内溶液恰好完全溶解） 。
3、将细胞转移到一15ml Falcon管中 。
4、加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管） 。
5、离心3分钟 。
6、弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次 。
7、接种在明胶包被的6孔或6cm组织培养皿 。
8、孵育 。
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