革兰氏染色的原理是通过结晶紫初染和碘液媒染后 ， 在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物 ， 革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密 ， 故遇乙醇脱色处理时 ， 因失水反而使网孔缩小 ， 再加上它不含类脂 ， 故乙醇处理不会出现缝隙 。
因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内 ， 使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差 。
【什么是革兰氏染色原理】在遇脱色剂后 ， 以类脂为主的外膜迅速溶解 ， 薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出 ， 因此通过乙醇脱色后仍呈无色 ， 再经沙黄等红色染料复染 ， 就使革兰氏阴性菌呈红色 。
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