薄层层析 薄层层析装置图


薄层层析 薄层层析装置图

1.TLC概述
◆定义:将固定相与支持物制作成薄板或薄片,流动相流经该薄层固定相而将样品分离的层析系统
◆原理:色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质 , 进行反复的吸附或分配等作用 , 从而将各组份分开 。
◆特点:样品用量少(微克~毫克级),分析快速
◆分类:按所用固定相材料不同,分为吸附、分配、离子交换、凝胶过滤等薄层层析 。我们常用的硅胶,氧化铝层属于吸附色谱 。
图 1
2.点样一成功分离的关键
a.点样原点小而圆,直径尽量不受超过2mm
b.在便于显色的前提下,点样量尽量少 , 防止过载施尾或掩盖Rf相近的点
C.点样勿伤及薄层表面
d.点样原点尽量远离薄层边缘,至少相隔3mm , 减少边缘效应
e.选择规则的矩形薄板;
f.所有点样点要保持在一条与底边平行的直线上,务必点交又点
g.点样完后,溶剂用电吹风尽量吹千

图 2
3.展开技巧
a.尽量用新配制展开剂
b.展开剂用量适中 , 不能漫过点样原点
c.展开缸盖的密封性要好;
d.薄层板侧边不能贴到展开缸壁;
e.理想的展开位置为保证Rf值在0.2-0.8之内
f.薄层板尽量用镊子夹住小心放入展开缸中.,而不是用手捏住放入

图 3
◆看板注意这几点:一看、二照、三碘、四显
a.用摄子小心取出薄层板,吹千溶剂荆;
b.首先在目光下观察,划出有色物质的斑点位置;
c.在紫外灯下观察有无暗斑或荧光斑点
d.大部分有机物会吸附碘,可逆的产生棕色或黄色斑点;e既无色又无紫外吸收的物质,可以用显色剂显色f千万注意,等高的点 , 不一定是同一个物质
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