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培养基的配制方法

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1、配制用水
培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量 。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的
双蒸水或三蒸水可以符合使用条件 。
2、培养基
培养基有天然、人工两种 。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制 。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长 。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理 。
3、血清
培养中常使用小牛血清（或胎牛血清） 。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用 。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15% 。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基 。
4、抗菌素
【培养基的配制方法】为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/毫升，链霉素100微克/毫升 。
5、植物血凝素（PHA）
非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂 。
经实验测定其分裂高峰分别于培养后44-48小时和68-72小时 。
PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分 。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用 。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均
被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好 。

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