浓缩胶和分离胶的作用分别是什么
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1、浓缩胶的作用:浓缩胶有堆积作用 。带电荷的蛋白质或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形成一条狭窄区带,以减少电泳过程中的谱带扩散 。
2、分离胶的作用:蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶,由于分子筛作用,小分子的物质容易通过,阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大的阻力而被滞后 。
浓缩胶积沉胶和分离胶有什么区别各自在电泳中的作用是什么【浓缩胶和分离胶的作用分别是什么】浓缩胶里完成完全SDS化、以及把一些大的离谱的东西去掉分离胶就分离 。。。
分离胶与浓缩胶的成分区别1、性质不同
浓缩胶:在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%?5% 。
分离胶:不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同 。它具有分子筛效应的小孔径凝胶 。
2、过程不同
浓缩胶过程:由于浓缩胶浓度低、孔径大,分离胶浓度高,孔径小 。带电蛋白质或核酸离子在大孔径凝胶中运动时,阻力小,运动速度快 。当接近小孔径凝胶时,阻力较大,移动速度减慢,使样品浓缩,形成窄带,减少电泳过程中的带扩散 。
分离胶过程:蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶,由于分子筛的作用,小分子物质容易通过,阻力小,迁移速度快 。大分子由于较大的电阻而滞后,因此,即使具有类似净电荷和相等的游泳率的物质,也会根据分子量的不同而通过分子筛效应从凝胶中分离出来 。
wb浓缩胶的用处wb浓缩胶的作用:
有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带,在电泳的时候可以看到样品被压成一条线 。
浓缩胶是在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%?5%,称为浓缩胶,其余部分浓度为6%?8%,称为分离胶 。由于浓缩胶浓度低、孔径大,而分离胶浓度高、孔径小 。带电荷的蛋白质 或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形 成一条狭窄区带,以减少电泳过程中的谱 带扩散 。浓缩胶与分离胶的pH值不同也可以强化样品的浓缩作用 。
Western浓缩胶多久凝固这个得看实验中TEMED和AP的量,质量如何,另外实验室温度也会有影响 。如果一切正常,也是室温的话,或温度稍高,有个20-30min是可以用了 。但是如果AP失效,TEMED不太好,或者实验室温度较低的话,这个时间就得延长 。具体延长多少,需要根据分离胶凝固的时间作为参考进行判断 。
有的时候为了保险起见,有人会让胶聚合1个小时以后再使用 。不过也需要担心过长时间放置可能会导致胶的水分蒸发,出现皱缩 。
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