Cas9蛋白相当于限制酶 , 当Cas9蛋白与水稻TMS5基因结合后,使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 。然后插入碱基A,并将两个片段在DNA连接酶作用下得到编辑成功的TMS5基因 。
【cas9蛋白相当于什么酶】通过PCR技术扩增编辑成功的TMS5基因,需要根据一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物 。然后在基因的上游连接启动子,可作为RNA聚合酶识别和结合的部位,再组装到相应的载体上,除此之外 , 基因表达载体的结构还应包括复制原点、终止子、标记基因等 。
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